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细胞胞内染色操作流程是什么？

2023-10-20 你知道细胞胞内染色操作流程是什么吗？让我们一起来看看吧！一、细胞计数将培养好的细胞收集于15mL离心管并计数；500g离心4min，去上清。二、制备单细胞悬液将收集的细胞用1mL0.5%BSA/PBS溶液重悬，400g离心3min，去上清，重复2次；用0.5%BSA/PBS溶液重悬细胞至浓度1x106个细胞/mL，分配到96孔板中，每孔100μl细胞悬液，400g离心5min去上清。三、固定每孔加入100μl细胞固定剂重悬细胞，2-8°孵育20min。四、洗涤400g离心5m...

免疫细胞（ICC）实验步骤有哪些？

2023-10-19 免疫细胞化学(ICC)是一种使用荧光抗体或染料来检测细胞内靶抗原的技术。那么你知道免疫细胞（ICC）实验步骤有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、细胞培养/固定很多抗原在离体组织中只存在很短时间，自溶（autolysis）和坏死（necrosis）使得抗原进一步降解，组织形态和结构被破坏。样品浸泡在合适的固定液中，固定液完quan渗透组织，使蛋白失去活性，并且使组织被保存、稳定在接近invivo状态。二、通透处理通透即为对细胞膜进行打孔处理，使抗体能进入到细胞中和抗原发生结合。通...

免疫组化实验常见问题有哪些？

2023-10-19 免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)是一种综合定性、定位和定量；形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时，还能观察到组织病变与该病原的关系，确认受染细胞类型，从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。那么你知道免疫组化实验常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、石蜡切片再染色过程出现脱片现象1.烤片时间不够，或温度不够，可以延长烤片时间和提高烤片温度；2.用含有多聚赖氨酸的玻片，可以购买到或这自己做；3.有些组织本身就...

二代测序（NGS）的原理

2023-10-18 DNA测序技术一直是分子生物学相关研究中常用的技术手段之一，从一定程度上推动了该领域的快速发展。每一代测序技术的更替都标志着生物学中基因芯片、数据分析、表面化学、生物工程等技术领域有了新的突破，使测序向着高通量、低成本、高安全性和商业化的方向发展。那么二代测序(NGS)的原理是什么？让我们一起来看看吧！第二代测序(NGS)又称为高通量测序(High-throughputsequencing)，是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。二代测序引入了可逆终止末端，从而实现...

支原体污染的检测方法有哪些？

2023-10-18 支原体污染一般在显微镜下不可见，很难察觉，但细胞会受到极大的损伤，主要通过以下途径影响细胞生长及功能。那么支原体污染的检测方法有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、分离培养法检测方法：将待检样品接种到适合支原体生长的液体培养基或固体培养基中，如有支原体污染，液体培养基颜色会改变，固体培养基将会有菌落生长。优点：该方法被称为支原体培养法的金标准，可以检测绝大多数支原体。缺点：支原体生长到一定数量才能判断是否有污染，检测时间长，无法实现对支原体的快速检测二、原位染色法检测方法：通过染...

细胞被支原体污染，该怎么办？

2023-10-18 支原体是目前为止发现的最小的原核生物，支原体污染一般在显微镜下不可见，很难察觉，但细胞会受到极大的损伤，主要通过以下途径影响细胞生长及功能。那么细胞被支原体污染，该怎么办呢？让我们一起来看看吧！一、支原体污染的来源1.环境污染：如细胞培养房、细胞培养箱、超净工作台内已被支原体污染；2.实验器材的污染：移液枪、移液管、细胞培养皿、水浴锅等；3.细胞培养试剂的污染：培养基、胰酶、血清、细胞冻存液等；二、处理方法1.及时更换培养液：可以减缓支原体的污染，但不能wan全清除；2.使用...

夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么？

2023-10-18 ELISA的原理是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。那么你知道夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么吗？让我们一起来看看吧！一、夹心法原理夹心法使用的是两个抗体夹抗原或者两个抗原夹抗体的方法，这种复合物被称之为三明治夹心结构，利用一对配对wan全的抗体，可以特异性检测抗原，当然主要针对的是具有至少2个以上抗原表位的抗原，抗体的配对可是门技术活，很多公...

直接法与间接法的ELISA检测原理是什么？

2023-10-18 在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。那么你知道直接法与间接法的ELISA检测原理是什么吗？让我们一起来看看吧！一、直接法原理直接法是利用包被抗原，检测抗体或者进行重组蛋白的活性验证，利用蛋白与板材（即微孔板底）通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合，以及通过表面改性后的亲水键结合等等，当然也有利用亲和素预包被的板材，通过...