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同型对照抗体是什么？如何使用？

2024-10-17 一、什么是同型对照抗体？同型对照抗体是一种与检测抗体（一抗）相同种属、相同种型（和亚类）、具有相同标记物的但对目标抗原无特异性识别能力的一抗。检测抗体和同型对照抗体唯1的区别在于对待测样本中目标抗原的特异性识别能力。检测抗体能在代测样本中特异性识别并结合目标抗原，而同型对照抗体不会特异性结合任何存在待测样本中的抗原，其他属性二者是完权一致的。二、为什么需要同型对照抗体？在流式细胞术（FC）和免疫组织化学（IHC）等实验中，有很高的背景染色风险，我们会发现抗体与细胞的结合，可以...

RAW 264.7细胞传代和冻存

2024-10-16 一、传代培养传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。传代培养中的细胞传代培养（subculture），当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。二、RAW264.7细胞传代步骤在进行RAW264.7细胞传代时，首先需要将旧培养基弃去，并...

RAW 264.7细胞复苏

2024-10-16 要复苏RAW264.7巨噬细胞，首先需要将含有1mL细胞悬液的冻存管从液氮中取出并快速解冻于37℃水浴中，然后将其转移到1mL新鲜培养基的无菌管中，并ce底混合均匀。接下来，使用1000rpm的离心速度离心5分钟，将上清液倒掉，随后再加入1mL培养基并充分重悬细胞。将悬液加入含有适量培养基的培养皿或瓶中（10ml/10cm皿），并将其放置在培养箱中过夜培养（37℃，5%CO2）。第二天检查细胞的生长状态和密度，以确定是否需要进行传代操作。通过这些步骤，可以有效地复苏RAW26...

PCR-SBT基本原理

2024-10-15 1.PCR扩增PCR-SBT技术首先是对待测DNA进行PCR扩增，以扩增出分型区域。PCR，即聚合酶链反应，是一种在体外快速扩增特定DNA片段的方法。在PCR过程中，需要设计特定的引物，它们能够与待扩增的DNA片段两端互补结合。然后，在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，按照碱基互补配对的原则，合成新的DNA链。通过多次循环的变性、退火和延伸步骤，待测DNA片段得以大量扩增。在PCR-SBT技术中，为了扩增出HLA基因的多态性区域，通常需要设计多个引物对。这些引物对能够覆...

三一造血人血小板裂解液说明书

2024-10-15 【产品名称】中文名称：三一造血人血小板裂解液英文名称：HumanPlateletLysate(HPL)【货号】RC-002【规格】100mL/瓶、500mL/瓶【性状】本产品为橙黄色略浑浊的液体，久置或反复冻融后，浑浊现象更明显，并有絮状沉淀产生?！驹耸涮跫坎捎酶杀涠吃耸??！局靥跫胗行凇?20°C保存即可，长期储藏可置于-80°C条件下；建议收到本产品后，将本产品于4°C条件下放置过夜或37°C水浴0.5-1小时进行化冻，然后分装冻存；利用本产品配制的wan全培养基...

感受态细胞制备原理与举例

2024-10-14 一、感受态细胞即受体细胞通过理化方法处理，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态的细胞。二、感受态细胞制备原理将快速生长的大肠杆菌置于经低温0℃预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀（渗透作用），同时，Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞。大肠杆菌DH5α感受态细胞三、大肠杆菌DH5α感受态制备实验步骤实验步骤一从-80℃冰箱中取出保种的DH5α菌株，用灭菌的枪头吸取少量保菌液加...

PCR的提出和发展

2024-10-14 一、起源PCR的发明人，一般认为是穆里斯(K.Mullis)，他也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。穆里斯在好些写作中，包括1990年在《科学美国人》上的一篇文章，及1998年的自传《心灵luo舞》(DancingNakedintheMindField)，都曾提到PCR这个构想的起源。然而，PCR从构想到实现，真的就是穆里斯一人之功吗?PCR究竟是在什么样的环境下诞生的呢?穆里斯的出身是生物化学家，1972在加州大学伯克利分校取得博士学位，专长有机合成。一早他就表现出桀骜不...

单克隆抗体vs多克隆抗体

2024-10-14 单克隆抗体与多克隆抗体在多个方面存在显著的区别，这些区别包括它们的来源、特性、应用以及生产方式等。尽管单克隆抗体和多克隆抗体在特异性、稳定性和生产方式等方面存在差异，但它们在许多情况下可以互补使用。一、定义与来源单克隆抗体：是指通过B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞系所产生的抗体。这种抗体是由单一的B细胞克隆产生的，因此具有高度均一性和特异性。它们通常是通过杂交瘤技术从动物细胞中获得。多克隆抗体：则是从动物血清中获得的抗体，属于多种B细胞产生的混合物。这些抗体可以受到...