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如何对pcr结果进行分析?

2024-11-12 一、PCR结果分析的基本步骤：?1.基线设置?：实时PCR反应的基线是指在PCR的初始循环期间的信号水平，通常是3至15个循环之间，此时荧光信号几乎没有变化，可以认为是背景或反应的噪音。2.?阈值设定?：?qPCR的阈值代表的是明显超出基线的扩增信号水平，用以区分明确的扩增信号和背景。通常qPCR仪器自带软件会自动将阈值设置为基线荧光值标准偏差的10倍。3.?CT值计算?：Ct是指荧光信号超过阈值时对应的循环数，Ct值与目的基因的起始量成反比，可用于计算DNA初始拷贝数。4....

DMEM培养基变色原因

2024-11-12 DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培养基广泛应用于细胞培养。一般情况下DMEM培养基呈鲜红色，当细胞状态、培养条件以及培养基成分发生变化，培养基的颜色也会发生变化。以下是DMEM培养基变色的常见原因：1.pH值变化DMEM培养基中含有酚红，它是一种pH指示剂，能够根据培养基的pH值变化而改变颜色。在pH值低于6.8时培养基呈黄色，pH在7.4时为红色，pH高于8.2时则呈紫色。2.细胞代谢活动细胞在代谢过程中，会消耗培养基中的糖分并产生乳酸...

细胞漂浮也有可能是你操作不当！

2024-11-11 细胞如若在生长过程中遇到漂浮困境，你有没有想过会是操作不当？！接下来，跟随康康一起，探讨这个非微生物原因导致的细胞培养问题，并找到让它正常发展的解决方案。复苏后细胞漂浮原因一：细胞本身贴壁能力较弱比如细胞转染的明星细胞293T，它生长较快，但贴壁能力弱，容易出现明显的成片脱落现象。293细胞∝解决办法：提前使用明胶包被板子，增强吸附性。另外，还建议使用TC处理（tissueculturetreated）的培养瓶/皿促进细胞贴壁附着。复苏后细胞漂浮原因二：培养基选择错误比如29...

简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒TD407操作步骤

2024-11-08 简石琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。一、产品优点：1.从琼脂糖凝胶中快速（15分钟）高产量地回收超纯的DNA；2.特制的微量柱设计使得DNA可以在高浓度下洗脱到最小体积（≥10µl）；3.洗脱的DNA非常适合用于DNA连接、测序、标记、PCR等应用。二、操作使用：（以下离心操作步骤的离心力均在10,000-16,000xg之间进行）简石DNA回收试剂盒操作步骤一：使用刀片或手术刀把DNA片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到...

六孔板总是铺不均匀怎么办呢？

2024-11-08 细胞铺板不均会影响后续的干预效果和实验检测一致性和可信度。而细胞铺板不均匀又是大部分小伙伴们都会遇到的问题，那这个问题该怎么解决呢？下面就结合相关资料以及个人经验跟大家简单分享一下孔板铺板不均匀的可能原因以及可供参考的解决方法。六孔板铺不均匀原因一：板子选择问题板材质量不佳，导致铺板不均匀。一些廉价的孔板可能存在制造本身上的不均匀，从而导致细胞分布不均。这是因为细胞倾向于在板孔内部的某些特定区域黏附，这些区域通常存在细微的结构或化学性质的不一致。解决方法：更换表面平整度高的高...

Alzet渗透泵工作原理及优点

2024-11-07 一、Alzet渗透泵工作原理：渗透压泵可被埋植在实验动物的皮下或者腹腔，渗透层与泵体埋植组织之间高渗透压导致组织内水分通过泵体外层的刚性半透膜进入渗透层，从而挤压由柔韧的非渗透性膜组成的药池，使药池内的试剂以预定的速度释放。渗透压泵属于控释释放型给药系统，利用渗透压原理制成，可以实现药物的恒速释放，受生理因素的影响较小，是目前应用最多的控释制剂。二、Alzet渗透泵优点：1.安全：无菌包装、医疗级、创伤小、无异物排斥反应、可植入式2.多样：动物：如小鼠、大鼠等，已验证29种动...

单双端测序有什么不同？

2024-11-06 单端测序和双端测序的主要区别在于测序方式、应用场景和测序质量上。?一、?单端测序和双端测序的主要区别一：测序方式1.?单端测序（Single-Read）?：单端测序是从DNA片段的一端进行测序，只读取一个方向的序列信息。在测序过程中，DNA样本被片段化处理成200-500bp的片段，引物序列连接到DNA片段的一端，然后进行测序?。2.?双端测序（Paired-End）?：双端测序同时从DNA片段的两端进行测序，读取两个方向的序列信息。在构建文库时，两端都加上测序引物结合位点，...

一文了解mNGS

2024-11-05 继上文《一文了解tNGS》之后，今天我们讲讲它的“兄弟”——mNGS吧~一、?mNGS简介?mNGS（MetagenomicNextGenerationSequencing）?是一种无需培养即可快速鉴定感染病原体的新技术，即宏基因组学二代测序技术，正在改变病原微生物检测的现状。它通过无需培养样本的方式，实现高通量、快速鉴定感染病原体，显著提高了检测的敏感性和特异性。其原理、优点和应用场景如下。二、?mNGS原理mNGS通过对临床样本的DNA或RNA进行高通量测序，无差别、无选...