以下是 Polyplus jetPRIME® 转染试剂 的标准操作步骤（适用于贴壁细胞），操作前请确认细胞状态、核酸纯度及实验条件适配性。

一、试剂准备

二、 Polyplus jetPRIME® 转染试剂操作流程（24孔板为例）

 Day 0: 细胞铺板

1. 细胞计数：消化对数生长期细胞，调整密度。  

2. 铺板：  

   - 每孔加入 0.5~1×10? cells（贴壁细胞）  

   - 用 500μL wan-quan培养基（含10%血清+抗生素）培养。  

   - 关键：转染时细胞密度需达 70~90% 汇合度（过度生长降低效率）。

 Day 1: 转染（耗时<15分钟）

> ?? 所有步骤在无菌环境（超净台）操作，试剂室温平衡。

 三、关键优化参数

 四、悬浮细胞转染步骤

若转染悬浮细胞（如Jurkat、THP-1）：  

1. 离心收集细胞 → 重悬于 新鲜培养基（密度 0.5~1×10? cells/mL）。  

2. 按 1mL细胞悬液 + 混合液（1μg DNA + 2μL jetPRIME） 加入EP管。  

3. 轻柔混匀 → 37℃静置 15~30分钟 → 转移至培养板继续培养。

 五、 Polyplus jetPRIME® 转染试剂使用注意事项

1. 细胞状态：仅用健康、低传代细胞（传代<30）。  

2. 试剂保存：jetPRIME® 4℃避光保存（非-20℃），保质期内稳定。  

3. 避免污染：核酸和Buffer严格无菌操作。  

4. 毒性处理：若细胞死亡率高：  

   - ↓ 降低jetPRIME用量（如1μg DNA用1.5μL试剂）  

   - ↓ 缩短转染后培养时间（24h后换液）。  

5. 对照设置：必设 空载体对照组 + 未转染组。

 六、Polyplus jetPRIME® 转染试剂替代方案（特殊情况）

问题排查：若效率低 → 检查核酸纯度、细胞密度、试剂比例；或联系 polyplus代理——天津益元利康生物科技有限公司获取技术支持。